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Coagulation

Le sang qui sort des vaisseaux sanguins doit coaguler et former un caillot qui répare le défaut dans la paroi vasculaire. La coagulation accélérée et retardée peut avoir de graves conséquences. Chez les animaux de compagnie l’examen se fait principalement dans le cadre d’une intoxication accidentelle ou délibérée au rodonticide, mais aussi les maladies du foie, les malformations héréditaires congénitales, les infections graves, les inflammations, les réactions immunitaires et les situations de choc peuvent perturber la coagulation.

Au laboratoire, un échantillon de sang rendu incoagulable au prélèvement est remis dans un état coagulable. Le temps nécessaire à complèter la coagulation est mesuré.  Nous mesurons le temps de coagulation, la détection de produits de dégradation de la fibrine (D-dimères) ainsi qu’un test global de la coagulation qui mesure la vitesse de coagulation et la qualité du caillot formé (thromboélastographie).

Biochimie

C’est le département qui offre la plus grande offre de tests et qui est également le plus automatisé grâce à divers instruments et techniques d’analyses. À quelques exceptions près, les déterminations sont effectuées sur du sérum, la fraction liquide qui persiste après la coagulation du sang et qui surnage après la centrifugation. La biochimie de routine, en plus de l’hématologie de routine, constitue la base de tout examen sanguin dans lequel la fonction des organes vitaux, le métabolisme et l’équilibre ionique sont évalués.

Ici, les concentrations en ions, enzymes, substrats, protéines, hormones et vitamines sont déterminées et le fonctionnement de nombreux organes peut être surveillé, notamment les reins, le foie, les intestins, le pancréas, le cœur, les organes sexuels, la thyroïde et les surrénales.

La spectrophotométrie, la colorométrie, la fluorométrie, les électrodes sélectives d’ions, l’électrochimiluminescence, l’électrophorèse et la HPLC font partie des nombreuses techniques d’analyse utilisées dans ce département.

Sérologie infectieuse

La présence d’anticorps dans le sang contre un agent pathogène (virus, bactérie, champignon, parasite) prouve qu’il y a eu contact. Pour certains agents pathogènes, cela signifie aussi automatiquement une infection. Dans d’autres, cela ne peut que mettre en évidence un ancien contact où l’agent pathogène a été éliminé entre-temps. La vaccination provoque également une réaction anticorps qui ne peut pas toujours être distinguée d’une infection réelle.

Le degré (titre) de présence des anticorps ainsi que leur évolution dans le temps peuvent être utilisés pour distinguer un contact ancien, une vaccination et une infection active. Enfin, on peut déterminer quel composant (antigène) spécifique d’un anticorps germes de la maladie est présent, ce qui fournit à nouveau des informations sur la vaccination.
l’infection et le stade auquel se situe le processus d’infection.

Dans cette partie du laboratoire, nous utilisons des techniques d’analyse telles que le dosage immuno-enzymatique (ELISA ou EIA), l’immunochromatographie (IC), l’électrochimioluminescence (ECLIA), l’immunofluorescence (IFAT) et le Western Blot. Pour tous les systèmes, cela signifie que l’antigène est mis en contact avec le sérum du patient.
L’anticorps présent est lié, puis le complexe antigène-anticorps est rendu visible, soit pour un détecteur électronique, soit à l’œil nu.

PCR infectieuses

Certaines bactéries difficiles à mettre en culture, mais aussi des levures, des dermatophytes, des parasites et surtout des virus peuvent être mis en évidence en détectant une partie de leur matériel génétique (ADN ou ARN). Cette technique d’analyse permet d’obtenir des résultats nettement plus rapides que les méthodes de culture traditionnelles, qui peuvent durer de quelques jours à plusieurs semaines. Chez Zoolyx, le résultat de la plupart des analyses PCR infectieuses est connu le jour suivant l’arrivée au laboratoire (hors le samedi).

Il est important de prendre le prélèvement le plus approprié. Un germe ne se trouve pas n’importe où dans le corps pendant une infection. Selon le germe et le stade de l’infection, il est préférable de prendre du sang, de l’urine, des selles, du liquide synovial, une biopsie …

Ce département utilise la technique de PCR en temps réel. Après une étape d’extraction d’ADN/ARN, un fragment d’ADN/ARN unique pour le pathogène est détecté et copié. En incorporant des molécules de signal, un signal est généré après la copie. Ensuite, le cycle recommence, en faisant des copies de copies. Cette réaction auto-amplificatrice conduit à un signal croissant qui est significativement plus fort quand le germe est présent dans l’échantillon qu’en l’absence et  nécessitera également autant moins de cycles qu’il y a plus de germes présents.

Surveillance des substances thérapeutiques

Le TDM détermine la concentration d’un médicament dans le sang. Certains médicaments ont une marge thérapeutique étroite (différence de dose entre efficacité et toxicité) où il est important de ne pas administrer une dose
trop importante ou un traitement trop long (ou l’inverse).

En médecine vétérinaire, son application est plutôt limitée. Les paramètres les plus dosés sont le phénobarbital et le bromure de potassium lors du traitement de chiens épileptiques.

Microbiologie

D’une certaine manière, la sérologie infectieuse et la PCR pourraient également être comptées dans cette discipline, mais dans le laboratoire, ce département est principalement dédié à la culture et à l’identification de bactéries, champignons et levures provenant de différents types d’échantillons: urine, selles, ponctions, sang, prélèvements à partir des lésions corporelles, plaies et blessures, tissus, etc.

Une fois identifié, il peut être décidé de faire un antibiogramme (un test de sensibilité de la culture bactérienne, à différents antibiotiques) en tenant compte de l »espèce animale et du tissu / organe à traiter. Le profil de résistance complété par la concentration minimale à laquelle le germe ne se développe plus (CMI) aide à la sélection du traitement le plus approprié.

La culture des virus prend du temps, est spécialisée et est complètement remplacée par la PCR infectieuse dans les diagnostics de routine.

Les parasites, par contre, sont systématiquement isolés et identifiés dans les selles. Pour certaines espèces animales telles que les chevaux, les ruminants et la volaille, le nombre de larves / œufs par gramme de selles est plus important dans la décision de traiter ou pas.

Histologie

Pour un examen histologique, un morceau de tissu est incorporé à la paraffine après fixation puis découpé en tranches très fines. Les coupes sont colorées et évaluées au microscope par l’anatomo pathologiste. Non seulement les caractéristiques des cellules sont notées mais aussi leur relation mutuelle.

L’échantillon prélevé va d’un petit morceau de peau ou d’un organe plus volumineux (biopsie au « biopsy punch », biopsie par chirurgie puis suture) à un organe partiel ou complet, à une tumeur ou même à un membre. Dans un grand échantillon, les zones les plus pertinentes sont sélectionnées à partir desquelles des pièces plus petites sont découpées. Les tissus osseux
doivent d’abord être décalcifiés, ce qui peut prendre plusieurs jours.

L’examen histologique repose principalement sur la découverte de la cause sous-jacente d’une lésion observée (infectieuse, inflammatoire, immunologique, hormonale, tumorale) et, dans le cas de tumeurs, sur la détermination du type et sur le pronostic et les possibilités thérapeutiques possibles. En inspectant les marges d’une tumeur retirée chirurgicalement, il
est possible de vérifier si la tumeur a été complètement enlevée.

Cytologie

Au cours d’un examen cytologique, le frottis d’un liquide aspiré est coloré après fixation et évalué au microscope par un anatomiste pathologiste. La relation entre les cellules et l’architecture des tissus ne peut pas être retracée, mais en typant les cellules présentes, il est souvent possible se prononcer sur l’inflammation, le type d’inflammation, la présence de certains germes et les tumeurs.

Tout liquide aspiré (le liquide synovial, l’épanchement pleural ou abdominal, l’urine, le liquide céphalo-rachidien ou kystique, le sang …) convient à la cytologie, tout comme le gonflement des tissus mous (gonflement de la peau, ganglions lymphatiques et autres gonflements sous-cutanés). Les organes tels que le foie, la rate et les reins peuvent également être échantillonné par guidage ultrasonique . Les gonflements durs, en revanche, sont moins appropriés car le rendement en cellules est souvent faible, voire inexistant.

En raison de sa simplicité technique, il est parfois considéré comme une première étape de diagnostic avant de procéder à la biopsie et à la recherche histologique, mais il ne la remplace pas du tout.

Autopsie

Au cours d’une autopsie, on tente de déterminer la cause de la mort de l’animal. L’intention malveillante, l’achat et l’assurance, l’échec thérapeutique et l’intérêt scientifique sont de bonnes raisons de procéder à une autopsie. Afin d’enquêter sur un problème de production, de performance ou d’élevage, un ou plusieurs exemplaires peuvent être sacrifiés.

Les autopsies sont effectuées sous la surveillance d’un anatomiste pathologiste. Outre la description des anomalies constatées, des échantillons sont prélevés et conservés pour des recherches histologiques, microbiologiques, PCR ou toxicologiques. Ces examens supplémentaires ne démarrent qu’après consultation de l’expéditeur.

L’utilisation de ce service est liée à certaines conditions que vous pouvez trouver ici: (conditions autopsie). Les carcasses ne sont pas restituées sous aucun prétexte. Cependant, un crématorium reconnu peut récupérer l’animal à son libre choix. L’autopsie esthétique est possible moyennant des frais supplémentaires.

Toxicologie

La détection des toxines se fait mais, en tant que question ouverte, elle est impossible et inabordable. La présentation clinique et la progression de la maladie, le bilan sanguin, les constatations d’une autopsie et dans l’éventualité une visite du site doivent donner mener à une liste restreinte qui peut ensuite être recherchée si les échantillons appropriés sont disponibles. En cas de mortalité spectaculaire et soudaine, on pensent souvent à une intoxication, cependant une cause complètement différente est fréquemment apparente. L’autopsie est toujours indiquée en cas de mortalité subite.

Les intoxications intentionnelles ou accidentelles avec des insecticides, des rodenticides, de la strychnine et de l’antigel sont les plus courantes chez les chiens et les chats, et relativement faciles à détecter. Les métaux lourds tels que le plomb peuvent provoquer une intoxication aiguë soit chronique.
Les poisons à base de plantes, les toxines fongiques, les toxines bactériennes et les composés organiques complexes sont beaucoup moins évidents et sont rarement détectés en direct, mais plutôt supposés sur la base de toute l’histoire et des indications indirectes.

La recherche toxicologique peut aussi avoir une approche complètement différente: le dopage, dans le contexte d’un achat ou de la compétition. On peut retrouver la plupart des « médicaments » soit au sens pharmaceutique, soit au sens illégal (AINS, corticostéroïdes, anesthésiques locaux, sédatifs, tranquillisants, clenbutérol, furosémide, anabolisants, amphétamines, barbituriques, cocaïne, opiacés, cannabinoïdes, méthadone, …) dans le sang et / ou l’urine.

Les techniques analytiques (GC, MS, HPLC, ICP, etc.) utilisées à cet effet sont très complexes et spécialisées. Zoolyx dispose d’un vaste réseau de laboratoires partenaires en Belgique et à l’étranger pouvant répondre à cette question. Contactez nous.

La génétique

Grâce à l’analyse de l’ADN, des mutations provoquant des maladies héréditaires peuvent être détectées. La manière dont certaines caractéristiques, telles que les couleurs de robe, sont héritées peut également être identifée. Un troisième domaine d’application est l’identification et le pedigree.

Zoolyx propose un menu d’analyse génétique très complet pour les chiens, les chats et les chevaux, soit sous forme de test séparé, soit sous forme de paquet (CombiBreed® en CombiGen®). Consultez wikilab et découvrez tout sur l’offre de tests génétiques. Nous vous assisterons volontiers avec le bon choix de test.

Les techniques d’analyse se basent toutes sur le PCR et l’hybridation d’ADN. Toutefois, les techniques évoluent très rapidement, à la fois en termes de rapidité d’analyse, de capacité et de précision. Scientifiquement, il existe également un flux continu de nouvelles relations entre un trait ou une maladie et sa base génétique. Des tests sont régulièrement ajoutés et les paquets sont par la suite mis à jour.

En collaboration de VHL Genetics, Zoolyx est le partenaire préférentiel de la Société Royale Saint-Hubert pour l’analyse de pedigree et la santé génétique des chiens à pedigree.

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