FAQs Archive - Page 3 sur 7

Q: La valeur Ct est-elle la même que la valeur Cq ?

Oui . Au fil du temps, le paramètre a reçu de nombreux noms Ct: threshold cycle Cq: quantification cycle Cp: crossing point TOP: take-off point

Q: Comment la valeur Ct est-elle calculée ?

À la fin de l’analyse, nous verrons une courbe de réaction en forme de S . La courbe réactive d'un contrôle positif est utilisée pour déterminer le point de départ de l’augmentation exponentielle. C’est ce qu’on appelle le threshold . Le cycle dans lequel un échantillon positif dépasse le threshold est la valeur Ct de l'échantillon.

Q: Comment interpréter la valeur Ct?

Moins il faut de cycles pour dépasser le threshold, plus il y a de ce qui est recherché dans l'échantillon dès le départ. Un peu contre-intuitif, mais plus la valeur sera basse, plus l'échantillon sera considéré comme positif !

Q: Y a-t-il une zone grise entre négatif et positif?

Bien qu’il soit présenté comme un monde numérique - positif/négatif, le morceau ADN/ARN est présent ou non - il n’est pas si numérique du tout. Il y a toujours du bruit en arrière-plan, c’est-à-dire qu’il y a toujours un signal (faible) qui n’a rien à voir avec ce qui est recherché. C’est le cas de toute technique de mesure, et avec la PCR, c’est le résultat d’ une liaison non spécifique des primers et de la sonde . Avec la PCR, ce phénomène n'est pas sans conséquence . Après tout, il s’agit d’une technique d’amplification, une méthode de mesure qui amplifie systématiquement le signal. Pas simplement amplifié, mais exponentiellement amplifié. Si on amplifie assez longtemps (augmenter le nombre de cycles), le signal de bruit dépassera le threshold et donc l'echantillon semblera positif. C’est pourquoi nous nous arrêtons (par convention) à 40 cycles à quel moment l'echantillon est considéré comme négatif .